Zeocin是常用的高效筛选抗生素,适合多种细胞类型筛选表达Sh ble基因的载体(细菌、真核微生物、植物细胞和动物细胞)。 Zeocin是从轮枝链霉菌(Streptomyces CL990)分离得到的一种铜螯合的糖肽抗生素,通过嵌入DNA使其断裂而导致细胞死亡。Zeocin可在大多数需氧细胞中发挥功效。
溶解性:溶于水,溶于HEPES缓冲液。
溶液配制方法:将zeocin 粉末溶于HEPES buffer (5 g/l, pH 7.2+/- 0.1),浓度为100mg/mL。然后用0.22微米滤膜过滤。
生物活性:
Zeocin可选择Sh ble基因表达的细胞。与现在使用的其他动物细胞标记物无交叉抗性。因此这种抗生素可用来分离对其他筛选剂(如:庆大霉素,潮霉素)有抗性的克隆。Zeocin是一种属于争光霉素家族的糖蛋白抗生素,在体内能作用于大多数细菌(包括E. coli)、真菌(如:酵母菌)、植物细胞、动物细胞。 液体Zeocin可用于细胞培养,用于筛选转化株的Zeocin浓度根据pH值和盐浓度改变。pH越高,盐浓度越低,Zeocin活性越大。 普通大肠杆菌菌株筛选可在25 μg/ml zeocin浓度的低盐LB琼脂培养基中进行,pH调至7.5。