操作步骤:
1. 转膜结束后,用去离子水或 PBST洗膜,去除转膜缓冲液。
2. 将膜用 Fast blocking buffer 封闭 1 分钟,同时用附送的抗体稀释液分别稀释一抗、二抗,并将膜浸入稀释的一抗中,室温孵育 1 小时;再将膜转移稀释好的二抗中,室温孵育 1 小时。
注意:
1. 一抗和二抗孵育不要超过 1 个半小时,否则会产生比较强的背景;
2.同时孵育的 一抗二抗可以重复使用 1-2 次。
3. 用 PBST或 TBST(Tween20 浓度为 0.05%)洗膜三次,每次 10-15min。
4. 显色 (ECL / NBT)。
运送及保存条件
室温运输,4°C保存,一年有效。