HisPur Ni-IDA Agarose Gel
货号:HI020-10ml
规格:
价格:¥580
产品说明书
HisPur Ni-IDA Agarose Gel 是一种用于组氨酸(His-tag)标签蛋白纯化的亲和凝胶,俗称镍柱。其将镍离子(Ni2+)借助 IDA 等配基螯合在琼脂糖凝胶微球表面,通过亲水间隔臂降低空间位阻,实现对 His 标签蛋白的高效识别。IDA 利用两个游离羧基将 Ni2+螯合在琼脂糖微球表面,可快速、高效的实现复杂样品体系中 His 标签蛋白的识别及分离。通常带有 6 个及以上连续组氨酸标签的重组蛋白(6×His-tagged recombinant protein)被称为 His 标签蛋白。当蛋白样品溶液通过 HisPur Ni-IDA Agarose Gel 时,重组蛋白上的标签组氨酸残基能被亲和凝胶特异性捕捉,其它蛋白则不能被识别。洗涤后,His 标签蛋白可在非变性条件下或者变性条件下通过不同浓度竞争剂被解吸。该亲和凝胶可适用于细菌、哺乳动物细胞、昆虫及病毒等多种 His 标签表达系统中蛋白的纯化。纯化的蛋白可用于结构和功能研 究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。该凝胶具有良好的稳定性、生物相容性及再生性能,对 pH 环境及尿素、盐酸胍等变性剂有一定的耐受性,既有利于保持生物样品活性并可以提高产品收率。
本产品已经螯合了 Ni2+,呈蓝绿色,储存在 20%乙醇溶液;易于受到 EDTA/EGTA 等强螯合剂的影响造成 Ni2+离子流失 (<5 mM),同时 DTT、β-巯基乙醇等还原剂会在一定程度上还原的Ni2+,因此蛋白样品或者纯化过程所使用的溶液限制使用还原剂和螯合剂。镍柱耐受性 8 M 尿素,6 M 盐酸胍(吸附量略微降低影响不大,但是盐酸胍 6M 溶液浓度太高,容易析出盐酸胍晶体);EDTA 低于 2 mM,DTT、β-巯基乙醇还原剂尽量不要有,耐受性 0.01 mM。
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