GST(谷胱甘肽-S-转移酶)与目的蛋白融合表达后,被称为 GST 标签重组蛋白。GST 标 签重组蛋白可以通过 GST 特异性地结合到 GST-tag Purification Resin,而其它蛋白不能被结合,含 GST 标签的重组蛋白可被过量的还原型谷胱甘肽(GSH)溶液洗脱,从而实现 GST 标签蛋白的分离和纯化。由于纯化过程始终保持在温和的非变性条件下,得到的目的蛋白可以保持其自身的生物学活性,因此可以用于常规的结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白互作、蛋白与核酸互作等方面的研究。
GST-tag Purification Resin 可用于大肠杆菌表达的 GST 标签重组蛋白的纯化,也可用于哺乳动物细胞、昆虫细胞及杆状病毒等其它表达系统中表达的 GST 标签重组蛋白。GST 标签重组蛋白在大肠杆菌中表达时可溶性高,且可保持目的蛋白完整活性。许多真核蛋白在大肠杆菌中是以包涵体的形式表达的,建议真核蛋白与 GST 融合表达,可实现一部分蛋白的可溶性表达。通常在目的蛋白的 N 端加 GST 标签可保留 GST 的酶活性。本品凝胶的颗粒直径为 45-165μm。可耐受的最大压力为 0.025MPa,约合 5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为 0.5ml/min。本品对 GST 最大结合量为 5-6mg 蛋白/毫升凝胶。实际使用时的最大结合量取决于待纯化的 GST 标签重组蛋白的分子量大小和蛋白本身特性,分子量越大则最大结合容量越大,分子量越小则最大结合容量越小。目的蛋白分子量为 50kD 的 GST 标签重组蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为 8-12mg;目的蛋白分子量为100kD 的 GST 标签重组蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为 12-18mg;相同分子量的蛋白,若蛋白本身特性的不同,结合的最大容量也会有所不同。10ml 本品最多可纯化 25-30mg GST 蛋白。对于目的蛋白分子量为 50kD 的 GST 标签重组蛋白,每毫升凝胶的实际最 大纯化量约为 40-60mg。