本品可省去封闭步骤，转印完成后，无需封闭即可孵育；同时可以增强蛋白与抗体的结合，节省抗体用量。
1.转印完成后，用去离子水或者 PBST 洗膜，去除转印缓冲液。
2. 抗体孵育：按照抗体说明书建议稀释倍数的 2倍使用，分别稀释一抗和二抗（例：若抗体抗建议稀释 1：1000，使用本品即按照 1：2000 稀释）；孵育时间：一抗室温孵育 30min-1h，用PBST/TBST 洗膜三次，每次 5-15min；然后室温孵育二抗 1h，用 PBST/TBST 洗膜三次，每次 5-15min；再用 DDH2O 洗膜 5min。
3. 显色（ECL/NBT）
