本品可省去封闭步骤,转印完成后,无需封闭即可孵育;本品也可用于快速封闭,与传统孵育方法兼容。
1.转印完成后,用去离子水或者 PBST 洗膜,去除转印缓冲液。
2. 按照抗体说明书建议稀释倍数,用本品分别稀释一抗和二抗;进行抗体孵育,一抗室温孵育1h,用 PBST/TBST 洗膜三次,每次 5-15min;然后室温孵育二抗 1h,用 PBST/TBST 洗膜三次,每次 5-15min;再用 DDH2O 洗膜 5min。3. 显色(ECL/NBT)
注意:孵育不要超过 4h 或过夜,否则会产生较强的背景; 若用于快速封闭,封闭时间 3min,后续按照传统方法孵育即可。